1. Escolhendo a linha de celular correta
Ao escolher a linha celular apropriada para seu experimento, considere os seguintes critérios:
a. Espécie: Linhagens de células não humanas e não primatas geralmente têm menos restrições de biossegurança, mas no final seu experimento determinará se deve usar uma cultura de uma espécie específica.
b.Features: Qual é o propósito da sua experiência?Por exemplo, linhas celulares derivadas de fígado e rim podem ser mais adequadas para testes de toxicidade.
c.Limitado ou contínuo: embora a escolha de uma linha celular limitada possa fornecer mais opções para expressar a função correta, linhas celulares contínuas são geralmente mais fáceis de clonar e manter.
d.Normais ou transformadas: Linhagens de células transformadas geralmente têm maior taxa de crescimento e maior eficiência de semeadura, são contínuas e requerem menos soro no meio de cultura, mas seu fenótipo sofreu alterações permanentes por transformação genética.
e. Condições e características de crescimento: Quais são seus requisitos para velocidade de crescimento, densidade de saturação, eficiência de clonagem e capacidade de crescimento em suspensão?Por exemplo, para expressar proteínas recombinantes em altos rendimentos, pode ser necessário selecionar linhagens de células que tenham taxas de crescimento rápidas e a capacidade de crescer em suspensão.
f.Outros critérios: Se você estiver usando uma linha celular limitada, há estoque suficiente disponível?A linhagem celular está totalmente caracterizada ou você mesmo precisa verificá-la?Se você estiver usando uma linha celular anormal, existe uma linha celular normal equivalente que possa ser usada como controle?A linha celular é estável?Se não, quão fácil é cloná-lo e gerar estoque congelado suficiente para seu experimento?
2.Obter linhagens celulares
Você pode criar sua própria cultura a partir de células primárias ou pode optar por comprar culturas de células estabelecidas de fornecedores comerciais ou sem fins lucrativos (ou seja, bancos de células).Fornecedores respeitáveis fornecem linhas celulares de alta qualidade que foram cuidadosamente testadas quanto à integridade e garantem que a cultura esteja livre de contaminantes.Recomendamos não emprestar culturas de outros laboratórios porque eles têm um alto risco de contaminação da cultura celular.Independentemente de sua origem, certifique-se de que todas as novas linhas de células foram testadas quanto à contaminação por micoplasma antes de começar a usá-lo.
Horário de postagem: 01 de fevereiro de 2023