1.O que é cultura de células?
A cultura de células refere-se à remoção de células de animais ou plantas e, em seguida, cultivá-las em um ambiente artificial favorável.As células podem ser retiradas diretamente do tecido e decompostas por meios enzimáticos ou mecânicos antes da cultura, ou podem ser derivadas de linhas celulares estabelecidas ou linhas celulares.
2.O que é cultura primária?
A cultura primária refere-se ao estágio de cultura após as células serem separadas do tecido e proliferarem em condições apropriadas até ocuparem todos os substratos disponíveis (isto é, atingirem a confluência).Nesta fase, as células devem ser subcultivadas, transferindo-as para um novo recipiente com meio de crescimento fresco para fornecer mais espaço para o crescimento contínuo.
2.1 Linha celular
Após a primeira subcultura, a cultura primária é chamada de linha celular ou subclone.Linhagens celulares derivadas de culturas primárias têm uma vida útil limitada (ou seja, são limitadas; veja abaixo) e, à medida que passam, dominam as células com maior capacidade de crescimento, resultando em certo grau de genótipo na população consistente com o fenótipo.
2.2 Tensão celular
Se uma subpopulação de uma linha celular for selecionada positivamente da cultura por clonagem ou algum outro método, a linha celular se tornará uma cepa celular.As cepas celulares geralmente adquirem alterações genéticas adicionais após o início da linha parental.
3. Linhagens celulares limitadas e contínuas
As células normais geralmente se dividem apenas um número limitado de vezes antes de perder a capacidade de proliferar.Este é um evento geneticamente determinado chamado senescência;essas linhas celulares são chamadas de linhas celulares finitas.No entanto, algumas linhagens celulares tornam-se imortais por meio de um processo chamado transformação, que pode ocorrer espontaneamente ou pode ser induzido por produtos químicos ou vírus.Quando uma linha celular finita sofre transformação e ganha a capacidade de se dividir indefinidamente, ela se torna uma linha celular contínua.
4. Condição cultural
As condições de cultivo de cada tipo de célula são muito diferentes, mas o ambiente artificial para cultivo de células é sempre composto por um recipiente adequado, que contém o seguinte:
4.1 Substrato ou meio de cultura que fornece nutrientes essenciais (aminoácidos, carboidratos, vitaminas, minerais)
4.2 Fatores de crescimento
4.3 Hormônios
4.4 Gases (O2, CO2)
4.5 Ambiente físico e químico regulado (pH, pressão osmótica, temperatura)
A maioria das células é dependente de ancoragem e deve ser cultivada em um substrato sólido ou semissólido (cultura aderente ou monocamada), enquanto outras células podem crescer flutuando no meio (cultura em suspensão).
5. Criopreservação
Se houver excesso de células na subcultura, elas devem ser tratadas com um agente protetor adequado (como DMSO ou glicerol) e armazenadas em temperatura abaixo de -130°C (criopreservação) até que sejam necessárias.Para mais informações sobre subcultura e criopreservação de células.
6. Morfologia das células em cultura
As células em cultura podem ser divididas em três categorias básicas com base em sua forma e aparência (isto é, morfologia).
6.1 As células dos fibroblastos são bipolares ou multipolares, têm formato alongado e crescem aderidas ao substrato.
6.2 As células do tipo epitelial são poligonais, têm tamanho mais regular e estão ligadas à matriz em lâminas discretas.
6.3 Células semelhantes a linfoblastos são esféricas e geralmente crescem em suspensão sem aderir à superfície.
7. Aplicação de cultura celular
A cultura celular é uma das principais ferramentas utilizadas na biologia celular e molecular.Ele fornece um excelente sistema modelo para estudar a fisiologia normal e a bioquímica das células (como pesquisa metabólica, envelhecimento), os efeitos de drogas e compostos tóxicos nas células e mutagênese e efeitos carcinogênicos.Também é usado para triagem e desenvolvimento de medicamentos e fabricação em larga escala de compostos biológicos (como vacinas, proteínas terapêuticas).A principal vantagem de usar a cultura de células para qualquer uma dessas aplicações é a consistência e reprodutibilidade dos resultados que podem ser obtidos usando um lote de células clonadas.
Horário de postagem: 03 de junho de 2019